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兔C-反應蛋白(CRP)酶聯(lián)免疫試劑盒

兔C-反應蛋白(CRP)酶聯(lián)免疫試劑盒

簡要描述:產品名稱:兔C-反應蛋白(CRP)酶聯(lián)免疫試劑盒
成份:酶標板、試劑、標準品等
規(guī)格:48T/96T
保存條件:2~8℃,溫度6攝氏度,有效期6個月
服務:免費代測
精準度:高

產品型號: LB-40628271

所屬分類:其它ELISA試劑盒

更新時間:2022-05-04

廠商性質:生產廠家

詳情介紹


兔C-反應蛋白(CRP)酶聯(lián)免疫試劑盒

規(guī)格:96T/48T

產品用途:科研 實驗

公司服務:ELISA試劑盒 免費代測

兔C-反應蛋白(CRP)酶聯(lián)免疫試劑盒


1.標記方法 良好的酶結合物取決于兩個條件:即高效價的抗體和高活性的酶。抗體的活性和純度對制備標記抗體至關重要,因為特異性免疫反應隨抗體活性和純度的增加而增強。在酶標記過程中,抗體的活性有所降低,故需要純度高、效價高及抗原親和力強的抗體球蛋白,最好使用親和層析提純的抗體,可提高敏感性,而且可稀釋使用,減少非特異性吸附。
酶與抗體交聯(lián),常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室溫放置30分鐘后加入含5(g純化抗體的水溶液1ml,混勻并裝透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時(或過夜)使之結合,然后吸出, 5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小時,將上述結合物混合液加入等體積飽和硫酸銨溶液,置4℃冰箱30分鐘后離心,將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L、pH7.4PBS中,并對之透析過夜(4℃),次日離心除去不溶物,即得到酶標抗體,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,進行測定后,冷凍干燥或低溫保存。
2.酶標抗體標記效果測定:測定內容包括酶和抗體活性、結合物中酶含量和IgG含量、酶與IgG摩爾比值以及結合率。
(1) 酶與抗體的活性 常用瓊脂擴散或免疫電泳法,使抗原與抗體形成沉淀線,經PBS漂洗1天,再以蒸餾水浸泡1小時,將瓊脂凝膠片浸于酶底物溶液中著色,如果出現(xiàn)應有的顏色反應,再用生理鹽水浸泡,顏色仍然不褪,表示結合物既有酶的活性,也有抗體活性。良好的結合物在顯色后,瓊擴滴度應在1:16以上。另一個測定方法是用系列稀釋的酶標抗體直接以ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)方法進行方陣滴定,此法不僅可以測定標記效果,還可以確定酶標抗體的使用濃度。













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